产品货号：
YT451
中文名称：
NF-κB荧光素酶报告基因质粒
英文名称：
pNFκB-luc reporter gene plasmid
产品规格：
1μg|100μg
发货周期：
1～3天
产品价格：
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pNFκB-luc是用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。NF-κB质粒是以pGL6质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点，可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
| 组分 | 1μg | 100μg |
| pNFκB-luc报告基因质粒 | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
| Base pairs | 5610 |
| NFκB response element (κB) | 26-65 |
| luc2 reporter gene | 111-1763 |
| SV40 late poly(A) signal | 1798-2019 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2067-2485 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase | |
| (Neor) coding region | 2510-3304 |
| Synthetic poly(A) signal | 3329-3377 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3444-3463 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3701 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4492-5352 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5457-5610 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5559-5578 |
pNFκB-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下：
- pNFκB-luc中没有的酶切位点包括：
Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PaeR7 I PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I Sma I SnaB I Spl I Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xho I Xma I - pNFκB-luc中的单酶切位点包括：
Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 BstB I TT`CG,AA 3380 Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9 Sal I G`TCGA,C 3394 Acc65 I G`GTAC,C 15 Afl III A`CRYG,T 3644 Asp718 G`GTAC,C 15 ApaL I G`TGCA,C 3958 Kpn I G,GTAC`C 19 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 4223 Nhe I G`CTAG,C 21 Not I GC`GGCC,GC 4464 Bgl II A`GATC,T 67 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4488 Hind III A`AGCT,T 77 BstE II G`GTNAC,C 4491 BsrG I T`GTAC,A 602 Ahd I GACNN,N`NNGTC 4566 Dra III CAC,NNN`GTG 1258 Bsu36 I CC`TNA,GG 4922 Gsu I CTGGAG 21/19 1491 Pvu I CG,AT`CG 4936 Bpm I CTGGAG 22/20 1492 Sac II CC,GC`GG 4960 Mun I C`AATT,G 1938 Bst1107 I GTA|TAC 5076 BamH I G`GATC,C 2031 Xca I GTA|TAC 5076 Stu I AGG|CCT 2464 Spe I A`CTAG,T 5395 EcoN I CCTNN`N,NNAGG 2985 BsmA I GTCTC`/9 5407 BsiC I TT`CG,AA 3380 BsmB I CGTCTC 7/11 5408
pNFκB-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
RVprimer3(5559-5578):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
- 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pNFκB-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用百奥莱博的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(货号：YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(货号：YT273)。
- TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的可以激活NFκB的试剂，可以用作pNFκB-luc报告基因检测时的阳性对照。
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